Th1 细胞以分泌 IFN-γ 为功能标志、以转录因子 T-bet 为命运决定者,介导抗胞内病原与抗肿瘤的细胞免疫。本页给出从极化信号通路到验证指标的完整 Th1 体外极化方案。
Th1 的免疫学功能
Th1 是 CD4⁺ 辅助 T 细胞应对胞内病原(病毒、胞内菌如结核分枝杆菌与李斯特菌)的主力分化方向:其分泌的 IFN-γ 激活巨噬细胞的杀微生物机制、促进 B 细胞向调理吞噬方向类转换(IgG1/IgG3 等亚类),并驱动迟发型超敏反应(DTH)型炎症。在抗肿瘤免疫中,Th1 型环境有利于 CTL 浸润与功能维持。
Th1 应答过强则与器官特异性自身免疫病、感染性休克等病理过程相关;Th1/Th2 平衡是免疫调节研究的经典框架。
极化体系的细胞因子组合
Th1 极化的核心信号级联:外源 IL-12 经 STAT4 驱动 IFN-γ 表达,IFN-γ 自分泌经 STAT1 诱导主转录因子 T-bet,T-bet 一方面维持 IFN-γ 转录(正反馈环),另一方面抑制 Th2 主转录因子 GATA3,锁定 Th1 命运。
实操组合:在 anti-CD3/CD28 激活基础上加入 IL-12(驱动)+ IL-2(支持扩增)+ anti-IL-4 中和抗体(阻断 Th2 偏离)。英诺思 EasyTune™ 小鼠 Th1 诱导分化试剂盒(DM102)已将组合预配完成;各组分亦可单独采购自行优化。
验证指标
标准验证组合:① 胞内细胞因子染色——PMA+ionomycin 重刺激 4-5 小时后(加蛋白转运抑制剂)检测 IFN-γ⁺ 细胞比例;② 转录因子染色——T-bet 胞内/核内染色;③ ELISA——上清 IFN-γ 分泌定量。三项互相印证可区分"极化效率"与"单细胞分泌强度"。
- 起始群体:naive CD4⁺ T(SN3104/SN4104),阴选保证未受激
- 极化因子:IL-12(CTK412)+ IL-2(CTK401)+ anti-IL-4 中和抗体
- 验证指标:IFN-γ⁺ 细胞比例(流式)、T-bet 表达、ELISA 检测 IFN-γ 分泌
- 小鼠 naive CD4 有柱阴选(CBS4104)可选,兼顾纯度
推荐产品
常见问题
Th1 与 Th2 极化为什么互相拮抗?
两者的主转录因子存在交叉抑制:Th1 的 T-bet 抑制 GATA3(Th2 主控因子),Th2 的 GATA3 又抑制 T-bet 与 IL-12 受体链表达;同时各自的极化细胞因子(IFN-γ vs IL-4)对对方分化方向均有抑制作用。这种交叉调节保证群体命运单一化,也是实验中必须同时使用中和抗体阻断对立方向的原因。
Th1 极化一般需要培养多久?
通常极化培养 3-5 天即可检测:第 3 天可做早期 IFN-γ 胞内染色预判,第 5 天极化趋于稳定、适合正式流式验证与 ELISA 定量。若需要扩增更多细胞,可再补充 IL-2 培养 2-3 天后复检。