单核细胞/巨噬细胞/DC细胞解决方案 | 英诺思生物

单核细胞由骨髓前体发育而来，进入组织后分化为巨噬细胞与树突状细胞（DC），构成单核吞噬细胞系统。单核细胞以 CD14 为特征标记；巨噬细胞以 F4/80（小鼠）为经典标记，M1/M2 极化状态功能迥异；DC 以 CD11c 为标记，专职抗原提呈。英诺思提供覆盖三者的阴选试剂盒与阳选 Nanobeads，以及体外诱导分化的全套细胞因子。

• 单核：SN3401（人）/ SN4401（小鼠）无柱阴选 + anti-human CD14 Nanobeads（PH014）阳选
• 巨噬：anti-mouse F4/80 Nanobeads（PM480）、anti-mouse/human CD11b Nanobeads（PM011B）
• DC：anti-mouse CD11c Nanobeads（PM011C）
• 诱导分化：M-CSF（CTK490）驱动单核→巨噬；GM-CSF+IL-4 驱动单核→moDC

单核细胞约占人 PBMC 的 10%-20%，是巨噬/DC 诱导分化与炎症研究的重要起始材料。分选策略两种：无柱阴选（SN3401/SN4401）去除 T/B/NK/粒/红系，单核细胞不接触磁珠，适合后续培养分化；CD14 阳选（PH014）一步过柱富集，纯度可达 95% 以上，适合直接表型分析。

• 阴选优势：细胞未接触磁珠，后续 M-CSF/GM-CSF 诱导分化不受影响
• 阳选优势：操作时间短、纯度更高（>95%），适合流式分析/单细胞测序
• 样本制备：Ficoll 密度梯度离心得 PBMC 后直接上样

巨噬细胞是组织稳态与炎症的关键效应细胞，可分为组织驻留巨噬（小胶质、Kupffer 细胞等）与单核来源巨噬。分选策略：组织来源用 F4/80（小鼠）或 CD11b 阳选富集；骨髓/脾脏来源可直接阴选单核后体外诱导为 BMDM。英诺思提供 F4/80、CD11b 阳选 Nanobeads 与单核阴选试剂盒组合方案。

• 组织巨噬阳选：anti-mouse F4/80 Nanobeads（PM480）——腹腔/肺/肿瘤组织巨噬
• 髓系泛标记：anti-mouse/human CD11b Nanobeads（PM011B）
• 骨髓衍生巨噬（BMDM）：骨髓细胞 + M-CSF（CTK490）培养 5-7 天，无需预先分选
• 肿瘤相关巨噬（TAM）研究：肿瘤组织酶解 → 死细胞去除（Dep0001）→ F4/80 阳选

树突状细胞是功能最强的专职抗原提呈细胞，分为经典 DC（cDC1/cDC2）、浆细胞样 DC（pDC）与单核来源 DC（moDC）。分选策略：脾脏/淋巴结 DC 用 CD11c 阳选富集（小鼠），或 CD11c 联合 CD11b 分级；人外周血 DC 亚群丰度极低，常需先富集再分选。

• 小鼠 DC 阳选：anti-mouse CD11c Nanobeads（PM011C），脾脏 DC 经典方案
• 髓系 DC 共标记：CD11b（PM011B）与 CD11c 联用
• 人 DC 丰度低（<1% PBMC），建议先 CD14/CD45 富集或联系定制方案

体外巨噬细胞诱导：单核细胞（或骨髓细胞）在 M-CSF 驱动下分化为 M0 巨噬，再经 IFN-γ+LPS（M1）或 IL-4/IL-13（M2）极化。英诺思提供从单核分选、M-CSF/GM-CSF 细胞因子到 L929 条件培养基（含 M-CSF，BMDM 经典替代）的完整原料。

• BMDM：骨髓细胞 + L929 条件培养基（C400200）或 M-CSF（CTK490），7 天分化为 M0
• mo-Mac：人 CD14⁺ 单核（SN3401 阴选 / PH014 阳选）+ M-CSF（CTK490）5-7 天
• M1 极化：IFN-γ + LPS；M2 极化：IL-4（CTK304）+ IL-13
• 验证：CD68/F4-80 表达（流式/免疫荧光）、iNOS（M1）/Arg1、CD206（M2）

单核来源 DC（moDC）诱导：CD14⁺ 单核细胞在 GM-CSF + IL-4 驱动下分化为未成熟 DC（imDC），再经 LPS/TNF-α 刺激成熟（mDC），高表达 MHC-II 与共刺激分子，是体外抗原提呈与肿瘤疫苗研究的常用模型。

• 起始：人 CD14⁺ 单核（SN3401/PH014），阴选单核诱导效率更稳定
• 分化：GM-CSF（CTK491，鼠）/ 人 GM-CSF + IL-4（CTK304）培养 5-7 天
• 成熟：LPS / TNF-α 刺激 24-48h，检测 CD80/CD86/CD83/MHC-II 上调
• 抗原提呈功能：与 OT-1/CD8 T 共培养评估交叉提呈（见 T 细胞杀伤方案）