高纯度、静息状态的 T 细胞是功能研究可靠的起点。本页给出从分选策略选择、CD3/CD28 双信号激活到扩增与增殖监测的完整实验路线，并对比阴选与阳选的适用边界。
分选策略：阴选与阳选的本质区别
阴性选择（阴选）标记非目标细胞并以磁珠将其移除，目标细胞全程不接触磁珠与抗体——表面表位完整、无预激活风险，特别适合后续依赖细胞功能的实验（极化诱导、杀伤评价、CAR-T 制备）。阳性选择（阳选）直接标记目标细胞，纯度与得率更高，但磁珠可能占据表面表位或改变细胞行为。
无柱体系与有柱体系的差别在于分离方式：EasyIso™ 无柱阴选使用磁极（磁场）吸附磁珠标记细胞，目的细胞留在上清中直接回收，无需过柱，剪切力小、操作快；有柱体系（CBS 系列）配合美天旎 MS/LS 等标准分选柱使用，适合已有柱式设备的实验室。
激活：用磁珠重建 TCR + 共刺激双信号
生理性 T 细胞启动（priming）需要双重信号：TCR 识别肽:MHC（信号 1）与 CD28 接收共刺激分子信号（信号 2）。ActBeads™ CD3/CD28 激活磁珠将 anti-CD3 与 anti-CD28 抗体固化在珠面，接触培养中的 T 细胞即可同步传递两种信号，模拟抗原提呈细胞（APC）的功能。
与传统可溶抗体 + 饲养细胞的体系相比，磁珠系统成分确定、批次一致性好、刺激强度可由磁珠剂量精确控制；激活结束后用磁极吸附即可回收磁珠，细胞直接进入下游环节（CAR 转导、扩增或功能检测），是 CAR-T 制备的主流激活方式。
扩增与增殖监测
IL-2 是经典的支持 T 细胞增殖因子；IL-21 可抑制终末分化、维持中央记忆样表型，在 CAR-T 扩增中越来越多地与 IL-2 联用或替代使用。
增殖的定量检测首选 CFSE/CTV 标记稀释法：染料与细胞蛋白共价结合后随每次分裂均分至子代细胞，每分裂一代荧光强度减半，流式分析稀释峰即可重建增殖动力学并计算增殖指数，小鼠 T 细胞可用 MTC001 试剂盒。
- 分选 → 激活 → 扩增 → 检测 四步流程，全程可控
- 激活磁珠可洗脱收集后直接进入下游（CAR-T 制备、基因修饰、功能实验）
- 增殖检测：CFSE 标记后流式分析稀释峰（MTC001）
- 配套培养基与细胞因子：人/小鼠 T 淋巴细胞培养基（C300100/C400100）、IL-2（CTK301/CTK401）、IL-21（CTK321/CTK421）
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常见问题
分选后的 T 细胞可以直接冻存吗？
可以。建议使用无血清细胞冻存液（CR101）程序降温后液氮保存，复苏活力通常可保持 85% 以上。但若下游是极化诱导或杀伤功能实验，建议分选后尽快新鲜使用，避免冻融对功能状态的影响。
激活磁珠如何从培养体系中去除？
ActBeads™ 激活磁珠具磁性，将培养管置于磁极（磁架）上吸附 2-5 分钟，磁珠被吸附于管壁，倾出或吸出含细胞的上清即可完成去除，无需离心，细胞回收率与活力均不受影响。
激活多长时间后适合进行 CAR 病毒转导？
一般激活 24-48 小时、细胞进入活跃分裂状态时转导效率最高——逆转录病毒只感染分裂期细胞，此窗口期转导是 CAR-T 制备的通用做法；具体最优点需结合激活强度与病毒滴度预实验确定。